Klasická sloupcová chromatografie

Klasická sloupcová chromatografie, také známá jako chromatografie s kapalina-solid, je technika oddělení solutů založených na rozdílu v distribuci mezi stacionární fází (obvykle pevný adsorbent) a mobilní fáze (rozpouštědlo) . Základní princip lze shrnout jako další oddělená na smějnici, a to, jak se dává na to, že je dalším odděleným, a to je dále na základě námořnictva a je třeba se separovat na smějnici, a to, že je třeba se shrnout na smějnici, a to, jak je třeba, a to, jak se má shrnout, a to, že je to připsané, a to, že je dalším rozdělením na to, že je třeba se separovat na směj. Různé distribuční koeficienty mezi pevnou fází a mobilní fází .

Ve sloupcové chromatografii je stacionární fáze obvykle složena z porézních částic (jako je silikagel, hlinitý, aktivovaný uhlík atd. .), která má velkou specifickou povrchovou plochu a adsorpční centrum a může tvořit vodíkové vazby s molekulami solutu a jiných interakcí a další interakce, což je responzní za mobilní fáze, je za účelem mobilní fáze hodnoty za mobilní fáze a je odpovědná za mobilní fáze a je odpovědná za mobilní fáze, je to za mobilní fáze hodnota za mobilní pódi Molekuly ze stacionární fáze a její výběr by měl být stanoven podle polarity rozpuštěné látky a adsorpční charakteristiky adsorbentu .

V separačním procesu je roztok směsi zaveden do sloupce obsahující stacionární fázi . s tokem mobilní fáze, komponenty se pohybují po sloupci různými rychlostmi v důsledku různé adsorpční kapacity ., čím více polární komponenty jsou s nízkými složkami, a to však s pomalým} {{{2} je však s ní, že se s ní pohybují, a to s hladinou {{}}, ale o to, že se přibližují, ale {{2} se však s ní pohybují, a to . {{{} { Polarita je snadno odnesena mobilní fází a rychlost pohybu je rychlejší . Tímto způsobem každá komponenta tvoří na sloupci řadu barevných pásů, aby se dosáhlo separace .

► Účel derivátového léčby
Hlavním účelem derivatizace je změnit fyzikálně -chemické vlastnosti analytů tak, aby byly vhodnější pro separaci a detekci sloupcovou chromatografií . Konkrétně, derivační zpracování může dosáhnout následujících cílů:

1) Vylepšený výkon detekce: Zavedením funkčních skupin, které lze snadno detekovat, analyt generuje silnější signál na detektoru, zlepšuje citlivost a přesnost detekce .
2) Změňte molekulární strukturu nebo polaritu: Upravte polaritu analytu a zlepší jeho separaci ve sloupci a snižte špičkové a překrývání .
3) Zvýšená volatilita: U některých nezávislých analytů může derivatizace zlepšit jejich volatilitu, což usnadňuje oddělit a detekovat v plynové chromatografii .
4) Stabilní analyt: Citlivé funkční skupiny v analytu mohou být chráněny derivatizací, aby se zabránilo degradaci nebo změně během separace a detekce .

► Typ léčby derivátu
Derivatizace je převážně rozdělena na dva typy: derivatizace před sloupcem a derivatizace po sloupci:

1) Derivace před sloupcem:
Než analyt vstoupí do sloupce, chemicky reaguje s deriváty a vytvoří deriváty .
Deriváty jsou poté odděleny a detekovány na sloupci .
Derivatizace předběžně má výhody volných reakčních podmínek a snadné vícestupňové reakce, ale může také zavést nečistoty nebo ztratit vzorky .
2) Po odvození sloupce po sloupci:
Analyty jsou nejprve odděleny na chromatografickém sloupci a poté chemicky reagují s deriváty v buňce derivátů .
Výsledné deriváty jsou poté zadány do detektoru k detekci .

Derivace po sloupci má výhody dobré reprodukovatelnosti a méně ovlivňujících faktorů, ale vyžaduje další nástroje a vybavení .
► Příklady aplikace derivátového zpracování
Při extrakci a separaci přírodních farmaceutických chemických složek může kombinovat technologii derivátového zpracování následující aplikace:

1) Zlepšená citlivost na detekci: Například v analýze aminokyselin může zavedení snadno detekovatelných funkčních skupin (jako jsou fluorofory) prostřednictvím derivatizace před sloupcem zvýšit sílu signálu aminokyselin na detektoru, čímž se zlepšuje citlivost detekce .}
2) Zlepšit separační účinek: U některých sloučenin s podobnou polaritou nebo podobnou strukturou může být polarita upravena derivatizačním ošetřením, aby se separační účinek na chromatografický sloupec mohl zlepšit . například při analýze flavonoidů lze zavést různé funkční skupiny prostřednictvím derivatizačního ošetření a zlepšit se a zlepšit se odloučení a zlepšit se a zlepšit se odloučení a zlepšením a zlepšit se odloučení a zlepšit se a zlepšit účinek a zlepšit se oddělit a zlepšit se oddělit a zlepšit účinek a zlepšit se.
3) Ochrana citlivých funkčních skupin: Pro analyty obsahující citlivé funkční skupiny (jako je fenolický hydroxyl, amino atd. .), derivatizace může chránit tyto funkční skupiny před degradací nebo změnou během separace a detekce například v jejich acetulaci během degradace během acetizace při degradaci během jejich acetizace při dekoraci během acetizace během acetizace při dekoraci během acetizace při dekoraci během acetizace při dekoraci během acetizace při dekoraci při degradaci během acetizace během například v aceturaci během acetizace během jejich acetizace během jejich acety. separace .